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His标签多肽是一种常用于通过竞争性结合抗His标签抗体，从而在免疫沉淀时洗脱与抗His标签抗体结合的6X His标签融合表达蛋白的多肽。本制品不仅可以用于Anti-His Magnetic Beads免疫沉淀时His标签融合表达蛋白的洗脱，也可以用于常规的Anti-His抗体免疫沉淀时6X His标签融合表达蛋白的洗脱。

本制品竞争性洗脱His标签融合表达蛋白后，洗脱后的样品中不含抗His标签抗体的轻链和重链，可以有效解决免疫沉淀后Western检测时轻链和重链的干扰问题。普通的免疫沉淀，通常是通过加入上样缓冲液煮沸从而使His标签融合表达蛋白进入到溶液中，但此时抗His标签抗体的轻链和重链也会进入到溶液中，并很可能会干扰后续的Western检测。

本制品5mg/mL包装产品配制在TBS中，可以直接使用。25mg为粉末装。His标签多肽常用储存液浓度为5～25mg/mL，常用使用浓度为100～400μg/mL。

由于多肽的每次冻融均会引起部分失活，所以溶液装或粉末装配制成溶液后须分装后于-20℃或更低温度冻存，以避免反复冻融。

• 对于粉末装，由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或不可见的多肽层，所以在打开管盖前，建议在离心机中约8000～12000×g离心10～30秒，使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。
  
• 对于粉末装，使用TBS进行溶解，一般用移液枪的枪头轻吹几下或者轻轻摇晃瓶子，即可使多肽完全溶解。请勿用vortex剧烈振荡，以免多肽变性而失活；溶液装可直接用于后续配制。
  
• 免疫沉淀样品的His标签多肽竞争洗脱法：本方法为非变性法，洗脱效率高，且洗脱后的样品中不含抗His标签抗体的轻链和重链。
  
  • His标签多肽洗脱液的配制：根据样品量确定洗脱液的用量，取一定量His标签多肽储存液用TBS溶液进一步稀释His标签多肽溶液至150μg/mL。
    
  • 每个免疫沉淀样品加入100μL His标签多肽洗脱液(150μg/mL)，冰浴并摇晃孵育30分钟～2小时，为了提高洗脱效率，可延长孵育时间或重复洗脱。His标签多肽洗脱液体积一般为凝胶悬液或磁珠悬液的5倍。
    
  • 4℃，6000×g离心30秒，小心转移上清至新管中，上清即为洗脱的6X His标签融合蛋白。注意不要吸到凝胶。
• 洗脱的6X His标签融合蛋白置于4℃待用，或者-20℃长期保存。